■ 【TargetMol 明星分子】- MIK665: 精准拮抗Mcl-1，驱动线粒体途径凋亡的新利器

■ 1. 背景介绍

MIK665 (T12629L)，CAS: 1799631-75-6 是一种针对 Bcl-2 家族凋亡通路的化学探针，靶向抗凋亡蛋白 Mcl-1。在线粒体依赖的内源性凋亡程序中，Mcl-1 通过结合并中和 BH3-only 蛋白，同时限制效应分子 BAX/BAK 的活化，从而抑制线粒体外膜通透化（MOMP）、细胞色素 c 释放以及级联性半胱天冬酶的激活 [1,2]。MIK665 与 Mcl-1 相互作用后，打破这一生存轴，使 Bcl-2 家族相互作用的平衡转向促凋亡方向，特别是在依赖 Mcl-1 维持线粒体稳态的细胞中作用显著。

在机制层面，MIK665 拮抗 Mcl-1 的经典 BH3 结合沟槽，置换其所结合的 BH3-only 伙伴，并解除对 BAX/BAK 的抗凋亡束缚。由此，BAX/BAK 得以活化并在外线粒体膜上聚集，诱发 MOMP，随后触发起始与效应半胱天冬酶的活化，完成凋亡程序 [1,2]。在骨髓系白血病研究模型中，Mcl-1 往往是主导性的生存决定因子，对 Mcl-1 的选择性失活可降低凋亡阈值并促进线粒体通路启动，从而产生对白血病细胞活性的抑制效应。

MIK665 可作为解析 Bcl-2 家族信号网络的工具分子，用于功能性验证 Mcl-1 依赖性，刻画抗凋亡守护者（Mcl-1、BCL-2、BCL-XL）之间的分工，并考察在选择性抑制 Mcl-1 时 BH3-only 哨兵（如 BIM、PUMA、NOXA）的再分配 [1,2]。在实验操作上，将 MIK665 处理与 BH3 profiling、线粒体去极化的实时监测、细胞色素 c 释放检测以及半胱天冬酶3/7 活性读出相结合，可捕获内源性凋亡的时序与动力学。通过 BAX/BAK 的遗传干预可进行通路连锁验证，而监测 NOXA 或 BIM 水平有助于阐明以 Mcl-1 占位为核心的敏感性决定因素。

鉴于抗凋亡“缓冲”在 Bcl-2 家族成员间具有一定冗余性，MIK665 亦适用于组合扰动，用以解析共依赖关系。与功能性抑制 BCL-2 或 BCL-XL 的分子联用，可揭示代偿性重排以及在何种条件下 Mcl-1 成为控制节点。在骨髓系白血病模型中，此类组合有助于界定凋亡景观、识别 Mcl-1 依赖的生物标志并探索跨网络转移的生存负荷。总体而言，MIK665 为精确扰动 Mcl-1 控制点、研究线粒体凋亡机制提供了有效工具，并支持在骨髓系体系中围绕 Mcl-1 支配的命运决策开展机制驱动的发现研究 [1,2]。

■ 2. 文献分享

■ 2.1 Potentiation of apoptosis in drug-resistant mantle cell lymphoma cells by MCL-1 inhibitor involves downregulation of inhibitor of apoptosis proteins

▲ AZD5991与venetoclax联合在依鲁替尼和/或venetoclax敏感及耐药细胞系中诱导合成致死并增强细胞凋亡

MIK665 (T12629L) 被界定为一款作用于MCL-1的抑制剂。在本研究中，MIK665 在Mino与JeKo-1两种套细胞淋巴瘤细胞系中均导致抑制性凋亡蛋白（IAPs）水平下调。研究者在Mino细胞中对经MIK665处理后的IAPs进行了检测，并采用了该实验系列中规定的处理时程。综合结果表明，MIK665 通过作用于MCL-1通路，在多种MCL细胞模型中降低IAPs水平，契合研究对促凋亡信号机制的关注。[3]

■ 2.2 Predictors of response and rational combinations for the novel MCL-1 inhibitor MIK665 in acute myeloid leukemia.

▲ MIK665与venetoclax联合在获得性venetoclax耐药的AML细胞系中具有协同作用。

MIK665 (T12629L) 是一种MCL-1抑制剂。针对急性髓系白血病骨髓样本的离体分析显示，对MIK665的药物敏感性得分分布范围为34.9至5.2；剂量–反应数据显示，白细胞在敏感/中等/耐药组的IC50分别为5.4、45和134.8 nM，原始细胞为2、44.1和158.4 nM，单核细胞为3.8、14.5和22.9 nM，淋巴细胞为52.6、97.3和84.5 nM。结果指出，MIK665对向单核系分化的AML细胞尤其有效。分子层面上，ABCB1与BCL2L1表达与MIK665敏感性呈显著负相关，而LILRA2、IL17RA及FCGR1A（CD64）表达与较高的MIK665药物敏感性得分相关，更分化的FAB M4/M5表型对MIK665更敏感。联用研究显示，在ABCB1高表达样本中，ABCB1抑制剂与MIK665的组合获得显著更高的DSS与协同效应，支持通过共同靶向克服以ABCB1为特征的耐药。MIK665与venetoclax的组合在MIK665耐药样本及venetoclax耐药样本中均产生显著更高的DSS与协同效应，且与A1331852的组合在原发venetoclax耐药样本中亦显示有效。[4]

■ 2.3 Src inhibition potentiates MCL-1 antagonist activity in acute myeloid leukemia.

▲ MCL-1抑制剂/SKI-606方案杀伤原代AML原始细胞而不影响正常CD34⁺细胞，并阻断STAT3磷酸化（p-Y705）及下调MCL-1。

MIK665 (T12629L) 与Src抑制剂SKI-606联合可降低STAT3在Tyr705与Ser727位点的磷酸化，减少p-STAT3的核转位，并抑制MCL-1转录，同时下调MCL-1、c-MYC和BCL-xL。在U937与MV4-11白血病细胞中，该联合促进BAX与BAK的构象激活，阻断MCL-1与BAK的结合，并增加BAX与BAK的共沉淀；上述变化伴随PARP与caspase-3的切割。对线粒体通路的依赖性体现在：在BAX或BAK敲除，尤其双基因敲除细胞中，SKI-606 + MIK665的杀伤显著降低。STAT3及其靶标的功能相关性也得到验证：构成型活性STAT3显著保护细胞免受MIK665/SKI-606影响，并减弱对MCL-1、c-MYC和BCL-xL的下调；而在U937细胞中，外源表达c-MYC或BCL-xL均使其对SKI-606/MIK665联合显著不敏感。在MV4-11细胞中，SKI-606 + MIK665引发明显的K48型降解性泛素化与强烈的NOXA诱导，且在U937细胞中观察到相同结果。在原代CD34+ AML细胞中，MIK665 + SKI-606表现更为显著。[5]

■ 2.4 The tubulin polymerization inhibitor gambogenic acid induces myelodysplastic syndrome cell apoptosis through upregulation of Fas expression mediated by the NF-κB signaling pathway.

▲ GNA诱导的细胞周期阻滞。MDS-L细胞以2 µM GNA孵育24 h，分析前以BrdU标记4 h。

MIK665 (T12629L) 是一款MCL-1抑制剂。本研究中，MIK665可上调MDS-L细胞的Fas mRNA与蛋白表达，并与GNA联合时对Fas的上调呈现协同效应。相较于单用GNA，加入MIK665可在MDS-L、SKM-1、MDS-EB1及MDS overt AML细胞中进一步抑制细胞增殖，并进一步提高caspase 3/7活性。剂量组合实验显示，3 μM GNA + 50 nM MIK665、6 μM GNA + 50 nM MIK665、1 μM GNA + 50 nM MIK665、以及10 μM GNA + 50 nM MIK665分别在MDS-L、SKM-1、MDS-EB1与MDS overt AML细胞中几乎完全抑制细胞生长。上述结果表明，MIK665能够增强细胞凋亡并抑制生长，且与GNA联合时作用更为显著。[6]

■ 3. 结语

MIK665通过拮抗抗凋亡蛋白Mcl-1的BH3结合位点，置换其结合的BH3-only蛋白，释放促凋亡效应分子BAX/BAK，进而诱发线粒体外膜通透化、细胞色素c释放及半胱天冬酶激活，完成细胞凋亡。文献报道显示，MIK665可在套细胞淋巴瘤中降低凋亡抑制蛋白水平，在急性髓系白血病中对单核系分化细胞尤为有效，并能与Src抑制剂、venetoclax及微管抑制剂等联合使用，显著增强促凋亡效应。未来研究可聚焦于联合抑制Bcl-2家族共依赖成员、寻找预测药物反应的生物标志物，以及深入解析Mcl-1在血液系统肿瘤中凋亡调控网络的重构机制。

■ 4. Q&A

Q1: MIK665的主要分子靶点及作用机制是什么？

A1: MIK665主要靶向抗凋亡蛋白Mcl-1，通过结合其BH3结合位点，置换BH3-only蛋白，释放BAX和BAK，激活线粒体途径凋亡。

Q2: 文献中MIK665在哪些血液系统肿瘤中表现出显著活性？

A2: MIK665在套细胞淋巴瘤中通过降低IAPs表现出活性，在急性髓系白血病中特别对单核系分化细胞有效，并在联合用药中展现协同效应。

Q3: MIK665如何与其他治疗药物协同增强凋亡效应？

A3: MIK665与Src抑制剂SKI-606联合抑制STAT3信号，促进BAX/BAK活化；与venetoclax联合克服耐药；与微管聚合抑制剂甘柏酸联合增强Fas表达和细胞凋亡。

■ 5. 参考文献

[1] Youle RJ, Strasser A, et al. The BCL-2 protein family: opposing activities that mediate cell death. Nat Rev Mol Cell Biol. 2008;9(1):47-59.

[2] Czabotar PE, Lessene G, et al. Control of apoptosis by the BCL-2 protein family: implications for physiology and disease. Nat Rev Mol Cell Biol. 2014;15(1):49-63.

[3] Li Y, Lee H, Jiang V, Che Y, McIntosh J, Jordan A, et al.. Potentiation of apoptosis in drug-resistant mantle cell lymphoma cells by MCL-1 inhibitor involves downregulation of inhibitor of apoptosis proteins. Cell Death & Disease. 2023;14(11):.

[4] Saad J, Newman R, Khabusheva E, Aakko S, Durand E, Tambe M, et al.. Predictors of response and rational combinations for the novel MCL-1 inhibitor MIK665 in acute myeloid leukemia.. Molecular oncology. 2026;20(2):389-408.

[5] Hu X, Li L, Nkwocha J, Kmieciak M, Shang S, Cowart L, et al.. Src inhibition potentiates MCL-1 antagonist activity in acute myeloid leukemia.. Signal transduction and targeted therapy. 2025;10(1):50.

[6] Zhong C, Wang S, Xia L, Yang X, Fang L, Zhang X, Wang M, Zhao H, Wang G, Wu J, Guo R, Zhong M, Gohda E. The tubulin polymerization inhibitor gambogenic acid induces myelodysplastic syndrome cell apoptosis through upregulation of Fas expression mediated by the NF-κB signaling pathway. Cancer Biol Ther. 2024 Dec 31;25(1):2427374.