■ 【TargetMol 明星分子】- Daurisoline: 多靶点调控心脏离子通道与自噬，助力肿瘤免疫与神经保护

■ 1. 背景介绍

▲ Daurisoline (T3054，CAS: 70553-76-3)的化学结构式

Daurisoline (T3054)，CAS: 70553-76-3 兼具两项对实验极具价值的作用：抑制人源 hERG（KCNH2/Kv11.1）钾通道并阻断自噬。作为 hERG 抑制剂，Daurisoline 下调介导复极相的快速延迟整流钾电流（IKr），通过稳定非传导状态或阻塞内孔降低外向 K+ 外流，从而在模型系统中延长动作电位时程并改变膜电位动力学[1]。因此，Daurisoline 可用于解析 IKr 对复极保留的贡献、校准离子通道筛选平台，并在受控 IKr 封堵条件下刻画其他电流（如 ICa,L、IKs）的代偿变化。于电压钳流程中，Daurisoline 适合作为阳性对照，用于验证电流密度、激活/失活动力学及药物-通道状态依赖性，在异源表达或干细胞来源心肌细胞中尤为常用[1]。

作为自噬阻断剂，Daurisoline 可瞬时压制宏自噬通量。该通路以 ULK1 复合体启动噬体杯形成，依赖 Beclin 1–Vps34 Ⅲ类 PI3K 信号与 ATG 级联完成 LC3 脂化，并最终与溶酶体融合实现底物降解[2]。利用 Daurisoline 抑制自噬，有助于阐明溶酶体依赖性周转在细胞重塑、细胞器质量控制与应激适应中的必要性。实验读出可包括 LC3 加工与荧光斑点、p62/SQSTM1 累积及双标 LC3 通量检测，并可结合营养状态调节或 ATG 关键节点的遗传操作以定位受影响步骤[2]。

从信号层面看，Daurisoline 作用于电压门控钾通道通路（电荷移动、孔传导与整流共同决定 IKr 幅度）[1]，并调节 ULK1–Beclin 1–Vps34 轴、ATG8/LC3 蛋白偶联及溶酶体融合装置所协调的自噬体生物发生与清除[2]。研究应用上，Daurisoline 可用于：（i）急性抑制 IKr 以描绘复极保留、频率依赖与后去极化倾向；（ii）短暂阻断自噬降解以检验代谢重编程、蛋白聚集清除或细胞器维持对宏自噬的依赖。二者在同一系统中的正交干预，还可探究膜兴奋性与自噬起始的耦联，以及蛋白稳态压力对通道转运和功能的反馈。综上，Daurisoline 是进行通路绘图、靶点验证与机制分型的多用途小分子工具[1,2]。

■ 2. 文献分享

■ 2.1 SRGN-mediated reactivation of the YAP/CRISPLD2 axis promotes aggressiveness of hepatocellular carcinoma

▲ 通过划痕愈合实验（0、24、48小时）及Western blot检测证实，Daurisoline可抑制细胞迁移并下调SRGN蛋白表达。

Daurisoline (T3054) 在本研究中作为靶向SRGN的小分子被评估，涵盖分子动力学与体外实验两方面证据。分子动力学结果显示，Daurisoline–SRGN复合物在多项结构与能量学指标上表现出更优的稳定性，且Daurisoline可在SRGN蛋白的初始结合位点实现持续而稳定的占据；同时，该复合物呈现更大的埋藏溶剂可及表面积，体现出更为广泛的界面接触。这些计算结果共同指向Daurisoline与SRGN之间牢固而持久的相互作用。在体外层面，研究进一步表明，相较于索拉非尼，Daurisoline对SK-Hep-1细胞活性具有更好的抑制效果，并伴随更低的SRGN蛋白表达，提示其在所测条件下既能抑制细胞活性，又能降低靶蛋白水平。基于上述证据，研究将Daurisoline界定为针对HCC中SRGN驱动致癌通路的有前景单体分子。整体来看，Daurisoline兼具对SRGN的优越结合特征与可观的细胞学效应，包括降低SRGN蛋白水平并更强抑制SK-Hep-1细胞活性，支持其在调控SRGN相关肿瘤生物学中的潜在价值。[3]

■ 2.2 The Tacrine-Induced Endoplasmic Reticulum Stress in AChE-Expressed Cells Leads to Improper Assembly and Transport of the Oligomeric Enzyme: Reversal by Trehalose.

▲ 通过Western blot检测CHOP及p-eIF2α蛋白表达水平证实，Daurisoline可诱导表达AChE的NG108-15细胞发生内质网应激。

Daurisoline (T3054) 在一项细胞研究中被作为乙酰胆碱酯酶抑制剂进行评估，以观察其对内质网应激的影响。文中将Daurisoline列入受检抑制剂，并报告这些抑制剂会诱导内质网应激标志物CHOP的表达。在AChE高表达的NG108-15细胞中，包含Daurisoline在内的四种AChE抑制剂的处理，使CHOP水平较对照提高超过五倍，显示出明显的未折叠蛋白反应被激活。研究同时考察了化学伴侣对该应激的影响；与糖伴侣trehalose共同处理可显著降低CHOP表达，几乎恢复至对照水平，表明trehalose能够逆转由AChE抑制剂引发的内质网应激。由此结果可见，Daurisoline在此细胞模型中提升CHOP水平，并且该提升可通过与trehalose的联用而被明显减弱。[4]

■ 2.3 Daurisoline Modulates the TBK1-Dependent Type I Interferon Pathway to Boost Anti-tumor Immunity via Targeting of LRP1.

▲ 通过MC38荷瘤小鼠模型（C57BL/6及Balb/c-null）的体内实验，结合肿瘤生长曲线、瘤重测量及流式细胞术分析肿瘤微环境中cDC1s、NKT、CD8⁺T及巨噬细胞等免疫细胞比例和功能分子表达，并辅以CD8⁺T细胞清除、DC清除及巨噬细胞清除等干预实验证实，Daurisoline可有效抑制肿瘤生长并激活抗肿瘤免疫应答

Daurisoline (T3054) 被鉴定为一种强效的I型干扰素诱导剂，能够促进抗肿瘤适应性免疫。其在肿瘤细胞中强力激活I型干扰素通路，通过促进抗原呈递并募集与激活树突状细胞和T细胞来重塑肿瘤微环境。研究表明其触发LRP1介导的TBK1激活，且可特异性结合LRP1、损伤溶酶体功能并诱导AZI2依赖的TBK1激活；同时，通过靶向LRP1并调动树突状细胞、T细胞和巨噬细胞来发挥抗肿瘤免疫作用。体内外实验显示，Daurisoline 促进树突状细胞成熟，并增强肿瘤浸润CD8+ T细胞的IFN-γ与GzmB分泌；将巨噬细胞重编程为M1表型并提升吞噬活性；同时增加NKT细胞浸润。它通过靶向LRP1激活TBK1依赖的I型干扰素信号，显著抑制肿瘤生长并使肿瘤对PD-1阻断更为敏感。在联合应用方面，Daurisoline 与PD-1抗体或STING激动剂diABZI联用，可显著重塑肿瘤免疫微环境，促进CD103+树突状细胞成熟，促进T细胞活化与扩增，并诱导M2向M1的极化以增强细胞毒性CD8+ T细胞浸润。与diABZI联用时，协同增强I型干扰素通路激活，提高TBK1与IRF3磷酸化并减少STING降解，从而维持信号持续性；该组合协同抑制肿瘤体积与重量，扩增cDC1并上调CD40、CD80、MHC-I与MHC-II，增强CD8+ T细胞效应功能，提高肿瘤相关M1巨噬细胞并降低Tregs与M-MDSCs。[5]

■ 2.4 Protection of dauricine and daurisoline on PC12 cells damaged by glutamate or Aβ 25-35 .

Daurisoline (T3054) 被描述为一种双苄基异相关术语生物碱，并被明确认定为强效的自噬阻断剂。在以PC12细胞为模型、并分别经谷氨酸或Aβ25–35损伤的条件下，给予Daurisoline可降低细胞内钙水平。同时，Daurisoline在上述损伤背景下削弱了Ca2+/钙调蛋白/CaMKII通路的活性。这些离子与信号通路的改变与Tau蛋白磷酸化被抑制相一致，表明在受损的神经样细胞中，Daurisoline通过影响钙稳态并减弱Ca2+/CaM/CaMKII信号传导，从而产生下游的Tau磷酸化抑制效应。证据将这些观察结果置于来源于马兜铃科植物Menispermum dauricum DC的天然生物碱背景之中，并在谷氨酸与Aβ25–35双重损伤模型中，将Daurisoline对钙离子与CaM/CaMKII通路的调节与Tau磷酸化的降低直接关联起来。作为自噬阻断剂，Daurisoline同时展现出与这些通路层面效应相伴随的更广泛的细胞作用特征。综合来看，在特定的受损PC12细胞实验条件下，Daurisoline能够影响关键的生化过程——包括钙稳态、Ca2+/CaM/CaMKII信号以及Tau磷酸化。[6]

■ 3. 结语

Daurisoline 通过抑制 hERG 钾通道，降低快速延迟整流钾电流（IKr），以及阻断宏自噬通量，调节 ULK1–Beclin 1–Vps34轴及相关自噬机制，实现其生物学功能。文献表明，Daurisoline稳定非传导状态，延长动作电位时程，改变膜电位动力学，是电生理研究中重要的工具分子。其强效抑制自噬，支持对溶酶体依赖性降解过程的时控干预，有助于揭示细胞重塑与应激适应机制。此外，Daurisoline与致癌蛋白SRGN稳定结合，在肝细胞癌细胞中表现出优于索拉非尼的抑制效果。它还可诱导ER应激标志物CHOP表达（可被trehalose逆转），调控Ca2+/CaM/CaMKII通路，抑制神经样细胞中Tau蛋白磷酸化，并通过靶向LRP1激活TBK1依赖的I型干扰素通路，增强抗肿瘤免疫，提升PD-1阻断疗效。未来研究可聚焦于Daurisoline在膜兴奋性与自噬调控的协同机制，深入验证其抗肿瘤免疫作用，并拓展其在联合免疫治疗中的应用潜力。

■ 4. Q&A

Q1: Daurisoline 具备哪两项主要生物学活性？

A1: Daurisoline 主要抑制人源 hERG 钾通道，降低快速延迟整流钾电流（IKr），同时作为自噬阻断剂，压制宏自噬通量。

Q2: 文献中如何描述 Daurisoline 对肝细胞癌细胞的作用？

A2: Daurisoline 与肿瘤相关蛋白SRGN稳定结合，表现出优异的结合稳定性和广泛的界面接触，能更强烈地抑制SK-Hep-1细胞活性并降低SRGN蛋白表达，优于索拉非尼，显示其在抗SRGN驱动肿瘤通路中的潜力。

Q3: Daurisoline 在肿瘤免疫调控中有哪些表现？

A3: Daurisoline 通过靶向LRP1激活TBK1依赖的I型干扰素信号，促进树突状细胞成熟，增强肿瘤浸润CD8+ T细胞的IFN-γ与GzmB分泌，重编程巨噬细胞为M1表型，增加NKT细胞浸润，显著抑制肿瘤生长并提高肿瘤对PD-1阻断的敏感性，同时与PD-1抗体或STING激动剂协同重塑肿瘤免疫微环境。

■ 5. 参考文献

[1] Vandenberg JI, Perry MD, et al. hERG K+ channels: structure, function, and clinical significance. Physiol Rev. 2012;92(3):1393-1478.

[2] Mizushima N, Komatsu M, et al. Autophagy: renovation of cells and tissues. Cell. 2011;147(4):728-741.

[3] Zhang S, Hu H, Li X, Chen Q, Zheng Y, Peng H, et al.. SRGN-mediated reactivation of the YAP/CRISPLD2 axis promotes aggressiveness of hepatocellular carcinoma. International Journal of Biological Sciences. 2025;21(7):3262-3285.

[4] Wang X, Xia Y, Guo MS, et al. The Tacrine-Induced Endoplasmic Reticulum Stress in AChE-Expressed Cells Leads to Improper Assembly and Transport of the Oligomeric Enzyme: Reversal by Trehalose. J Neurochem. 2025;169(8):e70178.

[5] Tang B, Wang Y, Li L, Sun C, Dong J, Li R, et al.. Daurisoline Modulates the TBK1-Dependent Type I Interferon Pathway to Boost Anti-tumor Immunity via Targeting of LRP1.. Research (Washington, D.C.). 2025;8():0764.

[6] Ma X, Dai H, Liu S, Liu X, Zhang J, Meng X. Protection of dauricine and daurisoline on PC12 cells damaged by glutamate or Aβ 25-35 .. Brain research. 2025;1857():149609.